Fenüülgalaktosiid CAS:2818-58-8

Mõju ensüümi aktiivsusele: ensüümi β-galaktosidaasi aktiivsuse mõõtmiseks kasutatakse tavaliselt fenüülgalaktosiidi.Fenüülgalaktosiidi hüdrolüüsimisel β-galaktosidaasi toimel vabaneb p-nitrofenool.P-nitrofenooli akumulatsiooni saab kvantitatiivselt mõõta, andes ülevaate β-galaktosidaasi aktiivsusest.Seda efekti kasutatakse sellistes rakendustes nagu ensüümanalüüsid ja sõelumissüsteemid.

Geeniekspressiooni analüüs: fenüülgalaktosiidi kasutatakse sageli substraadina molekulaarbioloogia katsetes, et uurida geeniekspressiooni.LacZ geen, mis kodeerib β-galaktosidaasi, on tavaliselt sulandatud teiste huvipakkuvate geenide regulatoorsete järjestustega.LacZ geeni ekspressioon ja fenüülgalaktosiidi hüdrolüüs β-galaktosidaasi poolt võivad näidata uuritava sihtgeeni ekspressioonimustrit ja taset.

Sõelumissüsteemid: Fenüülgalaktosiid on β-galaktosidaasi aktiivsust kasutavate sõeluuringute oluline komponent.Üks laialt tuntud näide on sini-valge skriinimismeetod, mida kasutatakse rekombinantsete või transformeeritud rakkude tuvastamiseks molekulaarbioloogia katsetes.Kolooniad, mis on edukalt omastanud rekombinantse DNA või läbinud geneetilise rekombinatsiooni, ekspresseerivad β-galaktosidaasi, mis viib fenüülgalaktosiidi hüdrolüüsi ja sinise värvuse moodustumiseni.

Valgu puhastamine: mõnel juhul võib fenüülgalaktosiidi kasutada ligandina afiinsuskromatograafias, et puhastada valke, mis seonduvad spetsiifiliselt β-galaktosidaasiga või on selle poolt aktiveeritud.Huvipakkuval valgul võib olla afiinsusmärgis või fusioonmärgis, mis sisaldab β-galaktosidaasi siduvat domeeni.Valgusegu juhtimisel läbi immobiliseeritud fenüülgalaktosiidiga kolonni saab soovitud valgu selektiivselt alles jätta ja seejärel elueerida.