IPTG CAS:367-93-1 Tootjahind
Isopropüül-β-D-1-tiogalaktopüranosiid (IPTG) on laktoosi sünteetiline analoog, mida kasutatakse tavaliselt molekulaarbioloogia uuringutes ja biotehnoloogia rakendustes.IPTG-d kasutatakse peamiselt geenide ekspressiooni esilekutsumiseks bakterisüsteemides, kus see toimib molekulaarse vallandajana sihtgeenide transkriptsiooni algatamiseks.
Kui IPTG lisatakse kasvusöötmele, võtavad bakterid selle endasse ja see võib seonduda lac-repressorvalguga, takistades sellel lac-operoni aktiivsust blokeerimast.Lac-operon on laktoosi metabolismis osalevate geenide klaster ja kui repressorvalk eemaldatakse, ekspresseeritakse geene.
IPTG-d kasutatakse sageli koos lacUV5 mutantse promootoriga, mis on lac promootori konstitutiivselt aktiivne versioon.Kombineerides IPTG induktsiooni selle mutantse promootoriga, saavad teadlased saavutada kõrge geeniekspressiooni taseme.See võimaldab toota suures koguses valku puhastamiseks või muudeks järgnevateks rakendusteks.
Lisaks geeniekspressioonile kasutatakse IPTG-d sageli ka sinist/valgetest skriinimistestides.Selle meetodi puhul liidetakse lacZ geen tavaliselt huvipakkuva geeniga ja bakterid, mis edukalt ekspresseerivad seda sulandgeeni, toodavad aktiivset β-galaktosidaasi ensüümi.Kui IPTG lisatakse koos kromogeense substraadiga, nagu X-gal, muutuvad fusioongeeni ekspresseerivad bakterid β-galaktosidaasi aktiivsuse tõttu siniseks.See võimaldab tuvastada ja valida rekombinantseid tüvesid, mis on huvipakkuva geeni edukalt integreerinud.
Geeniekspressiooni indutseerimine: IPTG-d kasutatakse tavaliselt sihtgeenide ekspressiooni esilekutsumiseks bakterisüsteemides.See jäljendab looduslikku indutseerivat laktoosi ja seondub lac-repressorvalguga, takistades sellel lac-operoni blokeerimist.See võimaldab soovitud geenide transkriptsiooni ja ekspressiooni.
Valgu ekspressioon ja puhastamine: IPTG induktsiooni kasutatakse sageli suures koguses rekombinantsete valkude tootmiseks erinevatel eesmärkidel, nagu biokeemilised uuringud, terapeutiline tootmine või struktuurianalüüs.Kasutades sobivaid ekspressioonivektoreid ja IPTG induktsiooni, saavad teadlased saavutada bakteriaalsetes peremeesorganismides sihtvalgu tootmise kõrge taseme.
Sinine/valge sõelumine: IPTG-d kasutatakse sageli koos lacZ geeniga ja kromogeense substraadiga, nagu X-gal, sini-valgete sõeltestide jaoks.LacZ geen liidetakse tavaliselt huvipakkuva geeniga ja bakterid, mis edukalt ekspresseerivad seda sulandgeeni, toodavad aktiivset β-galaktosidaasi ensüümi.IPTG ja kromogeense substraadi lisamisel muutuvad fusioongeeni ekspresseerivad rekombinantsed tüved siniseks, võimaldades hõlpsat tuvastamist ja selekteerimist.
Geeniregulatsiooni uurimine: IPTG induktsiooni kasutatakse tavaliselt geenide ja operonite, eriti lac operoni regulatsiooni uurimiseks.Manipuleerides IPTG kontsentratsioone ja jälgides lac operoni komponentide ekspressiooni, saavad teadlased uurida geeniregulatsiooni mehhanisme ja erinevate tegurite või mutatsioonide rolli.
Geeniekspressioonisüsteemid: IPTG on mitmete geeniekspressioonisüsteemide, näiteks T7 promootoripõhiste süsteemide, oluline komponent.Nendes süsteemides kasutatakse lac promootorit sageli T7 RNA polümeraasi ekspressiooni juhtimiseks, mis omakorda transkribeerib sihtgeene T7 promootori järjestuste kontrolli all.IPTG-d kasutatakse T7 RNA polümeraasi ekspressiooni esilekutsumiseks, mis viib sihtgeeni ekspressiooni aktiveerimiseni.
| Koosseis | C9H18O5S |
| Analüüs | 99% |
| Välimus | Valge pulber |
| CAS nr. | 367-93-1 |
| Pakkimine | Väike ja mahukas |
| Säilitusaeg | 2 aastat |
| Säilitamine | Hoida jahedas ja kuivas kohas |
| Sertifitseerimine | ISO. |
